Phytomedicine：旋覆花内酯通过GSK-3β/β-catenin信号通路抑制肝细胞癌的发展和转移

背景：肝细胞癌（HCC）是导致癌症相关死亡的重要因素。中医（TCM）在治疗HCC方面有几个优势。旋覆花内酯（Britannin）是旋覆花的一种关键化合物，已被证明对多种癌症具有药理作用，但对其特异性抗HCC作用的研究仍然有限。

目的：探讨旋覆花内酯抗HCC的作用及其机制。

方法：采用MTT法、克隆形成法和流式细胞术检旋覆花内酯对HCC细胞株的细胞活性、增殖能力和凋亡情况。采用创面愈合试验和跨井迁移侵袭试验评价旋覆花内酯对肝癌细胞株的细胞迁移和侵袭能力。建立H22异种移植肿瘤小鼠模型，采用旋覆花内酯治疗，观察旋覆花内酯对HCC肿瘤的影响。Elisa法检测肝癌标志物AFP、AFP- l3、APT、TGF-β的表达水平，HE染色观察组织病理变化。

采用网络药理学和分子对接方法预测旋覆花内酯抗HCC作用可能的信号通路。利用表面等离子体共振（SPR）实验验证了旋覆花内酯与蛋白质的相互作用。采用细胞激酶活性功能实验检测旋覆花内酯对酶活性的影响。采用RT-qPCR和Western-Blot验证旋覆花内酯对小鼠HCC细胞和肿瘤组织GSK-3β/β-catenin通路相关关键基因mRNA表达和蛋白水平的影响。

结果：体外实验表明，旋覆花内酯能抑制肝癌细胞的活性、增殖、迁移和侵袭能力，促进其凋亡。体内实验显示，旋覆花内酯对移植肝癌肿瘤的生长有抑制作用，可降低移植小鼠的炎症浸润及肝癌标志物AFP、AFP- l3、APT、TGF-β的表达水平。

网络药理学和分子对接预测细胞粘附因子和GSK-3β/β-catenin通路可能是相关的信号通路，与关键蛋白具有潜在的对接活性。SPR实验阐明了旋覆花内酯与GSK-3β之间的分子相互作用。酶活性测定表明，旋覆花内酯可以调节GSK-3β激酶的功能活性。RT-qPCR提示旋覆花内酯可调节β-catenin、GSK-3β、E-cadherin和NCadherin mRNA的表达。Western-Blot进一步证实旋覆花内酯能显著上调GSK-3β的表达，下调p-GSK-3β和β-catenin的表达。同时E-cadherin表达升高，NCadherin表达降低，从而减少EMT的发生，抑制HCC的转移。

结论：综上所述，旋覆花内酯具有抑制肝癌生长、发展和转移的作用，其机制可能与调节GSK-3β/β-catenin信号通路抑制肝癌上皮-间质转化有关。

原始出处：

Lu Q, Zhu J, Teng L, Chen C, Bi L, Chen W. Britannin inhibits hepatocellular carcinoma development and metastasis through the GSK-3β/β-catenin signaling pathway. Phytomedicine. Published online October 2, 2024. doi:10.1016/j.phymed.2024.156126